关键词:荧光原位杂交FISH|实验技术服务
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荧光原位杂交FISH|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户*。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌:荧光原位杂交FISH|实验技术服务
测序实验流程:
应用背景
对于利用rRNA的荧光原位杂交来说,如下原因可导致较低的荧光信号强度:
较低的细胞核糖体含量
较低的细胞周边的通透性
较低的目标序列可接触性(由于rRNA的折叠产生的构象,有些位置与rRNA分子内其他链或其他rRNA或蛋白紧密接触,从而使探针无法和目标序列杂交)
为检验细胞中的目标序列是否*被探针杂交,及测试较佳杂交温度,可利用"克隆荧光原位杂交"(clone-FISH)进行试验:将rRNA基因结合入质粒,转化至大肠杆菌中表达,构成核糖体,再用荧光标记的探针杂交。
FISH可与流式细胞术联用,对特定荧光标记的细胞进行计数或者分离。
优点:
1、荧光试剂和探针经济、*;
2、探针稳定,一次标记后可在两年内使用;
3、实验*、能*得到结果、特异性好、定位准确;
4、FISH可定位长度在1kb的DNA序列,其灵敏度与放射性探针相当;
5、多色FISH通过在同一个核中显示不同的颜色可同时检测多种序列;
6、既可以在玻片上显示中期染色体数量或结构的变化,也可以在悬液中显示间期染色体DNA的结构。
缺点:不能达到**杂交,特别是在应用较短的cDNA探针时效率明显下降。
应用*
凝集[反应] 凝集原 被动血凝反应 间接凝集反应 间接凝集抑制反应
反向间接凝集反应 协同凝集[反应] 沉淀原 沉淀[反应] 沉淀素
带现象 前带现象 后带现象 沉淀试验 环状沉淀试验
乳环状试验 比浊测定 *比浊法 双向*扩散试验 定量单向凝胶扩散试验
*电泳 对流*电泳 火箭*电泳 交叉*电泳 *固定电泳
反向*印迹 中和试验 病毒中和试验 补体结合抑制试验 补体结合试验
间接补体结合试验 *亲和层析 *珠试验 红细胞凝集试验 乳胶凝集试验
冷凝集素 血凝试验 鞣酸化红细胞试验 絮凝试验 血凝抑制试验
短膜虫试验 哈姆试验 *溶血 库姆斯试验 抗球蛋白试验
直接抗球蛋白试验 间接抗球蛋白试验 混合抗球蛋白反应 消耗试验 抗体吸收试验