关键词:promega
产品简介:不重复历史┇只开创价值 提供较优质的产品和较周到的服务,为祖国科研事业的快速发展做出贡献。上海斯信生物科技进口promega,价格低,质量好,批次较新,免费技术指导,免费产品代测,免运费,服务周到,是国家重点实验室及国内各大院校长期*供应商,本promega仅供科研使用不能用于临床。期待您的来电!
产品信息:promega公司主要产品:
AnaSpec公司(美国)是蛋白质组学研究和生产领域的业界**者,该公司很早就获得了GMP药物生产的CDA及FDA认证,长期以来一直为科研工作者提供各种优质产品和相关服务。AnaSpec公司提供种类齐全的各类产品, 包括合成肽,用于多肽合成和药物研制的组合化学试剂, 荧光试剂, 氨基酸, 抗体, 生物素试剂, 检测试剂盒及其它附件。
AnaSpec公司不仅供应产品,而且还根据客户需要提供各种服务,服务内容包括客户所需抗体生产, 客户所需染料合成, 以及客户试剂盒的设计和演示服务。在连续12年向各*药厂和研究所提供产品和服务的过程中,AnaSpec公司由于不断的创新和对产品质量的严格要求而获得了良好的声誉。
1、合成肽(Peptides)产品:
2、多肽检测试剂和抗体(Peptide Detection Reagents & Antibodies)产品:
3、组合化学试剂(Combinatorial Chemistry)产品:
LS004520 Galactose Oxidase (GAO) 半乳糖氧化酶 150 un 480
LS004522 Galactose Oxidase (GAO) 半乳糖氧化酶 450 un 870
LS004524 Galactose Oxidase (GAO) 半乳糖氧化酶 1 ku 1500
LS004090 Galactosidase, Beta (BG) β-半乳糖氧化酶 5 ku 705
LS004099 Galactosidase, Beta, Purified (BGC) β-半乳糖氧化酶 纯化的 1 ku 855
LS004100 Galactosidase, Beta, Purified (BGC) β-半乳糖氧化酶 纯化的 5 ku 3495
LS003981 Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, Lyophilized (ZFL) 葡萄糖-6-脱酶 冻干粉 1 ku 870
LS003980 Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, Lyophilized (ZFL) 葡萄糖-6-脱酶 冻干粉 10 ku 6705
LS003997 Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, Lyophilized (ZFLD) 葡萄糖-6-脱酶 冻干粉 2 ku 870
LS003998 Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, Lyophilized (ZFLD) 葡萄糖-6-脱酶 冻干粉 18 ku 6705
LS003983 Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, Suspension (ZF) 葡萄糖-6-脱酶 悬浮液 500 un 450
LS003985 Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, Suspension (ZF) 葡萄糖-6-脱酶 悬浮液 5 ku 3360
LS003992 Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, Suspension (ZFD) 葡萄糖-6-脱酶 悬浮液 900 un 450
LS003993 Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase, Suspension (ZFD) 葡萄糖-6-脱酶 悬浮液 9 ku 3360
LK002064 Hank's Balanced Salt Solution 10X (HBSS10) (HBSS10) 10x含汉克平衡盐缓冲液 1 ea 900
promega推荐使用:
含组氨酸标签的蛋白的诱导表达及纯化
一. 用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因
所需特殊试剂:1M IPTG
1. 将目的基因与IPTG诱导表达载体连接,构成重组质粒并转化相应的表达用的大肠杆菌。将转化体铺于含相应抗生素的LB平板,37℃培养过液。通过酶切序列分析等筛选带有插入片段的转化体。
2. 分别挑取对照菌和重组菌1个菌落,接种于1ml含有相应抗生素的LB培养液中,37℃通气培养过液。
3. 取100微升过液培养物接种于5ml含有相应抗生素的LB培养液中(各10份),适当的温度(20-37℃)震荡培养4小时,至对数中期(A550=0.1-1.0)。
4. 对照菌和重组菌各取1ml未经诱导的培养物于离心管中,剩余培养物中加入IPTG至终浓度分别为0.5,1.0,1.5,2.5,3.0,3.5,4.0,4.5,5.0mM相同的温度继续通气培养。
5. 在诱导的1,2,3,4,5个小时取1ml样品于Ep管中。
细菌的生长速率严重影响外源蛋白的表达,因此必须对接种菌量,诱导前细菌生长时间和诱导后细菌密度进行控制。生长过度或过速会加重细菌合成系统的负担,导致包涵体的形成。生长温度可能是影响大肠杆菌高度表达目的蛋白的较重要因素。低温培养能在一定程度上抑制包涵体的形成。IPTG的浓度对表达水平的影响也非常大。所以通过试验确定较佳的培养条件是很必要的。
6. 将所有样本室温较高速度离心1分钟,弃上清,沉淀重悬于100微升1×SDS蛋白上样缓冲液中,100℃加热5分钟,室温较高速度离心1分钟,取15微升样品上样于SDS聚酰胺凝胶,用SDS-PAGE观察表达产物条带,从而确定优化的培养条件。
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